Анализы на боррелиоз и клещевой энцефалит: показания, методы исследования и расшифровка результатов

Несмотря на то, что клещевой вирусный менингоэнцефалит (КВМЭ) может вызывать тяжелые формы болезни и даже приводить к смерти, на ранней стадии развития этого заболевания его симптомы могут напоминать другие опасные болезни, такие как боррелиоз, полиомиелит, менингит, тиф и энцефалит, вызванные японским комаром. Поэтому очень важно провести дифференциальную диагностику как можно раньше, чтобы точно определить истинную причину возрастающих симптомов.

Необходимость различения КВМЭ и боррелиоза объясняется тем, что оба заболевания распространены в одних и тех же регионах и могут возникнуть после укуса клеща весной или летом. Если вы находитесь в эндемичном регионе и обнаружили клеща на своем теле, тогда вам нужно незамедлительно провести лабораторные исследования биоматериала. Если результат оказывается положительным, то нужно немедленно обратиться к инфекционисту или терапевту и принять экстренные меры в ближайшие 4 суток после укуса насекомого.

В данном обзоре рассмотрим, какие методы диагностики используются для обнаружения заболеваний, вызываемых КВМЭ и боррелиозом, а также какие показатели анализов являются сигналом для немедленных действий.

Боррелиоз и энцефалит: как различить их и когда стоит сдавать анализы на заражение

Существует множество заболеваний, переносимых клещами, и среди них есть два, которыми можно заразиться, не выезжая за пределы России - это энцефалит и боррелиоз (болезнь Лайма). Несмотря на то, что эти инфекционные болезни поражают ЦНС, они имеют существенные различия. Клещевой энцефалит вызывается вирусом, а клещевой боррелиоз - бактериями. Болезнь Лайма поражает не только ЦНС, но и суставы, кожный покров, сердце, в то время как энцефалит преимущественно протекает в острой форме.

Стоит также упомянуть про иммунитет: после перенесенного энцефалита иммунитет становится стойким и продолжительным, тогда как боррелиоз вызывает замедленный иммунный ответ с последующим развитием аутоиммунных реакций. Интересно, что повторное заражение боррелиозом возможно только через 7 лет.

При развитии болезней появляются свои характерные симптомы, что делает возможным их различение. Если есть подозрение на заражение, рекомендуется обратиться к врачу и пройти соответствующие анализы.

Болезнь Лайма, или боррелиоз, – это заболевание, которое не проявляется сразу после заражения организма. Для того, чтобы иметь действительно достоверные результаты диагностики, необходимо сдавать биоматериал в установленные сроки. Если же поспешить, можно получить ложноотрицательный результат, что сильно портит картину заболевания. Если же анализ дал ложноположительный результат, его следует проверить с помощью альтернативных методов диагностики или повторно сдать через определенный период времени, как это назначил врач.

При возникновении подозрений на клещевой боррелиоз необходимо сдать специальные анализы. Как правило, результаты становятся показательными спустя 2 недели после заражения. Сначала в крови обнаруживают антитела IgM, а затем - IgG. Максимальная концентрация антител достигается через 3 месяца. Если результаты первого анализа оказываются неоднозначными, то следует сдать иммуноблот, который поможет определить наличие заболевания более точно.

Подготовка

Для проведения серологического анализа специальной подготовки не требуется, однако специалисты лаборатории рекомендуют воздержаться от приема пищи за 4 часа до сдачи крови и не курить за 30 минут до проведения исследования. Если речь идет об анализе синовиальной или спинномозговой жидкости, то рекомендуется производить забор материала на том участке тела, где может находиться возбудитель, и проводить процедуру до начала антибактериальной терапии.

Особо важно уделить внимание процессу подготовки клеща, если вам необходимо сдать на него анализ на энцефалит. Схема универсальна, и такой же порядок действий следует соблюдать и для любого другого типа исследования. Если вы не можете обратиться в травмпункт, то можно сделать это самостоятельно. Для этого тельце клеща нужно перехватить пинцетом или пальцами, обернутыми в салфетку, и извлечь его вращательными движениями строго перпендикулярно ранке. После этого клеща помещают в емкость с ватным тампоном или тканевой салфеткой, смоченной в воде, и при этом не имеет значения, живой это клещ или мертвый. Главное, чтобы тело насекомого находилось во влажной среде. Контейнер или пробирку плотно закрывают крышкой и доставляют в лабораторию в тот же день для анализа клеща на боррелиоз. Высокая оперативность действий необходима не только для скорейшей помощи пострадавшему, но и для максимально точного исследования.

Один из базовых методов исследования состояния организма - анализ биоматериалов. Чтобы получить результаты, требуется провести процедуру забора крови, суставной или спинномозговой жидкости. Какие методы используются для этого?

Для забора крови используется специальная пробирка, которую наполняют материалом после введения иглы в вену. Обычно результаты готовы в тот же день. Но анализ методом вестерн-блота может занять до 6 дней.

Для получения суставной жидкости проводят пункцию, вводя иглу диаметром 0,8 мм в пораженный сустав. Процедура довольно болезненная.

Спинномозговую жидкость берут при помощи пункции в области поясничного отдела, чтобы не повредить спинной мозг. Процедура производится в стационаре под местной анестезией и контролем врача. Результаты доступны уже на следующий день.

Важно, что весь биоматериал должен быть помещен в стерильные пробирки с гелем. Так кровь и жидкость сохранят свои свойства и пригодны для анализа на протяжении недели. Надо отметить, что данная диагностическая процедура может существенно помочь в постановке диагноза и назначении лечения.

Расшифровка результатов анализов может быть качественной или количественной. В первом случае результат может быть лишь положительным или отрицательным. Во втором - следует указывать точное количество антител в составе крови. Наличие или отсутствие заболевания оценивается по цифровым показателям, полученным в результате исследования.

Анализ на боррелиоз на антитела класса IgG расшифровывается следующим образом:

• результат менее 10 Ед/мл считается отрицательным, что означает, что у пациента нет инфекции или анализ был сдан слишком рано;
• при значении от 10 до 15 Ед/мл результат считается сомнительным;
• результирующее значение свыше 15 Ед/мл классифицируется как положительное. При этом положительный результат также может указывать на паренезированную в прошлом болезнь, а также на наличие у пациента других заболеваний, например, сифилис, бактериальный эндокардит или мононуклеоз. В любом случае, для окончательного вывода лучше повторить анализ через 1-2 недели.

Анализ на антитела класса IgM также имеет свои показатели:

• при значении менее 18 Ед/мл результат считается отрицательным;
• результирующее значение от 18 до 22 Ед/мл считается сомнительным;
• значение свыше 22 Ед/мл считается положительным. Как и в предыдущем случае, рекомендуется повторить анализ через 1-2 недели для получения окончательного ответа.

Статья про метод вестерн-блота: все, что нужно знать для правильного использования

Метод вестерн-блота используется для обнаружения антител к тем или иным антигенам. Результаты исследования выражаются в виде полос на тестовой мембране. Каждая полоса указывает на наличие или отсутствие антител к конкретному антигену. Результат теста может быть положительным, отрицательным или неопределенным.

Если антитела IgM обнаружены, тест будет считаться положительным. Если антитела не обнаружены, то результат будет отрицательным. Если слабые, неоднозначные полосы на тестовой мембране не позволяют делать выводы о наличии или отсутствии антител, то результат теста будет признан неопределенным.

Общее заключение по исследованию делается по каждому антигену, где ставится плюс или минус в зависимости от наличия или отсутствия антител. Метод вестерн-блота является эффективным при использовании в качестве дополнительного исследования.

Тем не менее, для получения более точных результатов, рекомендуется повторить тест через 3-6 недель после первого проведения. Это поможет исключить возможные ложноотрицательные или ложноположительные результаты.

Как сообщается, в результате анализа методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени, а также исследования клеща можно получить качественный ответ: обнаружена ДНК боррелии или она не обнаружена. Тем не менее, по одному анализу нельзя точно диагностировать боррелиоз, так как развитие этой болезни в организме человека происходит сложным процессом. Поэтому ни один метод нельзя считать исключительным. Важно не забывать о сдаче анализов на энцефалит, параллельно с исследованием клеща на боррелиоз, поскольку эти насекомые могут быть носителями обоих заболеваний одновременно и сдавать анализы на оба заболевания было бы разумным.

Клещевой энцефалит: лабораторная диагностика

Для диагностики клещевого энцефалита необходимо провести лабораторный анализ. Исследуется венозная кровь. Также проводят анализ клеща, который был удален с тела человека после укуса. Существуют различные методы, которые позволяют определить присутствие или отсутствие болезни у пациента.

Методы анализа

Один из методов диагностики клещевого энцефалита - иммуноанализ. Этот метод, аналогично тесту на боррелиоз, проверяет, есть ли в крови у человека специфические антитела к вирусу. Такие антитела бывают двух классов: IgG и IgM. Первые реагируют быстрее, говоря о недавнем заражении, вторые могут сохраняться на длительный срок. Для оценки результата необходимо рассмотреть наличие или отсутствие этих антител в сочетании с клиническими признаками. С данным методом можно успешно диагностировать болезнь на ранней стадии благодаря высокой чувствительности.

Согласно статистике, результат исследования крови оказывается положительным в 96% случаев в острый период болезни. Антитела IgM можно обнаружить уже на 4-й день после появления первых симптомов энцефалита.

Другой метод, который используется для диагностики этого заболевания - ПЦР-исследование клеща. Этот метод позволяет установить, присутствует ли у клеща ДНК вируса клещевого энцефалита. Даже если клещ не удалось вытащить целиком, для ПЦР-исследования могут быть использованы фрагменты клеща. Однако насекомое необходимо привезти в лабораторию незамедлительно после его удаления.

Как правильно сдавать анализ на клещевой энцефалит?

Появление антител к вирусу происходит в крови человека через 10-14 дней после заражения. Поэтому, если сдавать анализы на энцефалит раньше, результат будет отрицательным. Пик концентрации антител наблюдается к концу месяца и сохраняется в течение полугода.

Если вы предполагаете, что вас укусил клещ, то необходимо его поместить в контейнер и как можно скорее доставить в лабораторию. В случае, если исследование подтвердит заражение клеща, пациент должен оставаться под наблюдением медицинского персонала и через 2 недели сдать анализ на энцефалит.

Кроме того, может потребоваться проведение стартовой этиотропной терапии, включающей внутривенное капельное введение ацикловира (10 мг/кг) три раза в сутки и внутримышечное введение рекомбинантных интерферонов-α-2.

Каждый год в России зарегистрировывается от 6 до 8 тысяч новых случаев заболевания Лаймом. Болезнь, которую в основном обнаруживают у детей до 15 лет и молодых людей в возрасте от 25 до 45 лет, вызвана укусами клещей таежного (Ixodes Persulcatus) и европейского лесного клещей, также известных как "собачьи" клещи (Ixodes Ricinus). Кроме того, известны случаи заражения через ЖКТ при употреблении сырого молока от инфицированных коз, овец и коров.

Еще одним болезнетворным вирусом, вызываемым при укусах клещей, является клещевой энцефалит. Ежегодно в России диагностируется около 5-6 тысяч случаев этого заболевания. Вирус передается через укусы таежных (Ixodes Persulcatus) и европейских лесных (Ixodes Ricinus) клещей.

Существует несколько штаммов вируса клещевого энцефалита. Российские эпидемиологи выделяют центрально-европейский, сибирский и дальневосточный субтипы. Наиболее опасен последний, у которого летальность достигает 20-40%. В то время как при заражении центрально-европейским субтипом вируса она не превышает 1-3%.

Вирус клещевого энцефалита нейротропен, то есть поражает центральную и периферическую нервную систему, способен преодолевать гематоэнцефалический барьер, поражая либо не поражая головной мозг. По мере развития заболевания происходят постепенные и необратимые изменения в сосудах и оболочках мозга.

Болезнь протекает бессимптомно в первые две недели, а затем на 3-й неделе появляются высокая температура, головная и мышечная боль, тошнота и отсутствие аппетита. У четверти заболевших эти симптомы возникают позднее, спустя месяц после заражения. С течением времени боли усиливаются, появляются судороги, паралич конечностей, дезориентация, потеря сознания и даже кома. Если не оказать своевременной помощи, то заболевание может привести к летальному исходу.

Подготовка к анализу на энцефалит не требует специальной подготовки. Однако, перед посещением лаборатории необходимо воздержаться от еды в течение 4-х часов. Что касается исследования клеща, то его извлечение и доставка на анализ производятся точно так же, как и при тестировании на боррелиоз.

Исследование

Для проведения исследования кровь берется из локтевой вены. Получение результатов анализа на антитела класса IgM обычно занимает около 4 дней, в то время как результаты для класса IgG будут готовы через 6 дней. Анализ клеща на наличие энцефалита может занять до 3 дней.

Расшифровка итогов анализов на антитела

При получении результатов анализа крови на антитела IgG к клещевому энцефалиту, в выдаче присутствует понятие "титр". Это отражает количественный показатель концентрации антител к вирусу: от титра 1:100, 1:200, 1:400 и так далее до 1:1600. Значения выше 1:100 указывают на реакцию иммунной системы, вызванную инфекцией в прошлом, вакцинацией или введением профилактического средства. Значение титра меньше 100 говорит о том, что реакция отсутствует, и человек в случае заражения вирусом будет болен. Обычно для здорового организма показатель колеблется в диапазоне 200-400.

Результаты анализа крови на антитела IgM выявляют наличие иммуноглобулинов IgG и отсутствие IgM в крови - это положительные результаты, чаще всего, отражающие результат вакцинации. Однако, если в крови обнаружены оба показателя, это указывает на заражение клещевым энцефалитом. Для более точной диагностики рекомендуется повторить исследование через неделю.

Проводя исследование клеща, эксперты определяют наличие ДНК возбудителя заболевания. Если выявляется энцефалитный клещ, пациенту незамедлительно вводят специфический иммуноглобулин, который останавливает развитие вируса. По статистике исследований, данный метод эффективен и спасает в 60% случаев. Еще более надежная защита достигается путем плановой вакцинации. Однако, если человек стал жертвой клеща, это не означает, что он должен унывать и отказываться от своего здоровья. В случаях, когда анализ типа ПЦР показывает положительный результат, очень важна оперативная диагностика и внимание к любым изменениям самочувствия. После прохождения инкубационного периода энцефалита или боррелиоза, важно сдать лабораторные анализы, даже если клинические симптомы болезни не проявляются.

Отметим, что вся представленная информация, связанная со здоровьем и медициной, предназначена исключительно для ознакомления и не должна стать причиной для самодиагностики или самолечения.

В зависимости от того, какие симптомы преобладают, клещевой энцефалит может проявляться в нескольких формах. На Дальнем Востоке чаще встречаются очаговые формы, которые являются наиболее тяжелыми. В центрально-европейской части России преобладают неочаговые формы, которые, в свою очередь, являются менее серьезными.

Признаки поражения нервной системы можно заметить примерно через месяц после заражения - развиваются дефекты речи, возникает частичный паралич конечностей, наблюдаются перепады в настроении. Менингит развивается у некоторых больных, а также могут нарушаться сердечные ритмы.

Если не обратить внимания на болезнь, через год симптомы станут еще более серьезными - начиная от потери слуха и артрита до невралгии, сильной затрудненности с речью и потери ориентации в пространстве.

Переносчиками болезни Лайма, вызываемой спирохетоподобными бактериями, включая боррелию, являются иксодовые клещи. Те же самые насекомые распространяют энцефалит. Однако только 0,5-5,0% клещей из общей популяции относятся к числу носителей вирусов, а 20% - к носителям боррелии.

В случае болезни Лайма больной не заразится сразу после укуса клеща. Вирус живет в пищеварительной системе клеща, а не в его слюне. Это даёт некоторое время на удаление опасного насекомого. Однако нужно действовать быстро и правильно, чтобы не заболеть.

В случае болезни Лайма, главное - не допустить перехода заболевания на диссеминированную, распространенную или хроническую стадию. Боррелиоз лечится достаточно хорошо. При своевременном приеме антибиотиков в течение 2-4 недель практически гарантируется полное выздоровление.

Лечение энцефалита гораздо сложнее, чем лечение боррелиоза. И хотя возможно его излечение, но для этого используют разнообразные методы и лекарства. В отличие от боррелиоза, у клещевого энцефалита нет единого метода лечения, который гарантировал бы выздоровление.

Лечение проводится только в стационаре с применением широкого набора лекарственных средств, включающих патогенетические, симптоматические и этиотропные препараты. При комплексном лечении применяются лекарства, обладающие противовирусным, противовоспалительным, иммунологическим, нейропротекторным, детоксикационным, противоотечным, гормональным, психотропным и противосудорожным действием. Восстановительное лечение может включать ЛФК, трудотерапию, психотерапию, логопедию и т.д.

Нельзя не упомянуть о возможных серьезных последствиях энцефалита, таких как судороги, признаки деменции, атрофии мышц и другие расстройства ЦНС, которые могут сохраняться на всю жизнь.

Отметим, что наилучшей защитой от клещевого энцефалита являются антитела, образованные в организме человека. Их производство срабатывает в ответ на вакцину, которую следует делать в период осени, то есть за полгода до начала "клещевого сезона".

Кроме того, все чаще становятся популярными быстрые прививки, требующие три дозы вакцины в течение 21 дня. Эффективность такого профилактического мероприятия гарантирована на уровне от 91 до 97%. Лишь у 3% людей не вырабатываются антитела по статистике. Стоит отметить, что не существует вакцин от боррелиоза, и у человека нет возможности развивать стойкий иммунитет к бактерии, что возможно привести к повторной инфекции.

Трансляция инфекции

Важно отметить, что болезнь Лайма (боррелиоз) не передается от человека к человеку. Однако, существует вероятность трансплацентарной передачи через плаценту от беременной женщины к плоду. Это может объяснить, почему новорожденные могут быть диагностированы с этой болезнью. Обычно, после укуса инфицированного клеща, следует наблюдать за симптомами и оперативно начинать лечение. Это важно не только для боррелиоза, но и для энцефалита, так как обе болезни вызывают серьезные осложнения, могут привести к инвалидности и даже к летальному исходу. Если вы были укушены клещом, обязательно сдайте анализ на энцефалит. Кроме того, исследование крови помогает оценить эффективность проведенной вакцинации и исследовать причины неясных поражений центральной нервной системы. Анализ крови на боррелиоз также назначают, если при укусе был обнаружен зараженный клещ, и для оценки эффективности лечения, если болезнь все-таки развилась. Кроме того, лабораторные исследования могут помочь в исключении болезни при поражениях кожи, нервной и сердечно-сосудистой системы, артрите неопределенной этиологии.

Исследования на выявление боррелиоза

Обнаружить боррелии в организме человека достаточно сложно, так как они сосредоточены в пораженных тканях или жидкостях, например, кожные покровы на местах возникновения розеолы, кровь или ликвор. Однако, эффективность прямых методов определения наличия боррелий составляет лишь 50%. По этой причине используются косвенные методы обследования.

Наиболее показательным и простым способом является серологический тест, при котором у пациента берется кровь из вены и исследуется на наличие антител к боррелиям. Для более точного исследования, также исследуют спинномозговую или синовиальную жидкость. Помимо этого, необходимо незамедлительно доставить клеща в лабораторию для дополнительного анализа после его удаления из тела.

Существует несколько методов исследования и типов анализов для диагностики боррелиоза. Каждый метод имеет свои особенности в отношении биоматериала, используемых принципов исследования и показаний.

Один из основных методов — хемилюминесцентный иммуноанализ. Сыворотку венозной крови исследуют на наличие антител IgG и IgM к возбудителю заболевания. Точность анализа составляет 95%, а удельный вес ложноположительных результатов не превышает 5%. Для того чтобы исключить ошибку, в сомнительных случаях проводят иммуноблот, повышающий точность диагностики у пациентов с отрицательными результатами иммуноанализа.

Метод иммуноблота, также известный как вестерн-блот, дает расширенную картину о наличии антител к 10 антигенам боррелий, в том числе OspC p25, который позволяет судить о «свежей» инфекции. Для подтверждения положительного результата анализ следует повторить через 3–6 недель.

ПЦР с детекцией в режиме реального времени является методом выбора для диагностики заболевания на тех стадиях, где серологические исследования неинформативны, например, при необходимости ранней диагностики. Биоматериал, используемый для этого метода, может быть суставной или спинномозговой жидкостью. Он определяет ДНК как живых, так и неактивных бактерий, поэтому на основании результатов этого анализа нельзя ставить окончательный диагноз.

ПЦР-исследование клеща позволяет обнаружить в клеще фрагменты ДНК возбудителей болезней. При этом не имеет значения, живое насекомое или мертвое. Анализ занимает несколько дней, поэтому жители эндемичных по боррелиозу территорий должны обращаться к врачу-инфекционисту немедленно после установления факта укуса.

Фото: freepik.com